|
شامل تهیه گسترش
تهیه رنگ ورنگ
آمیزی باکتری می باشد
اولین اقدامات جهت شناسایی
باکتری برسی مستقیم باکتری در زیر میکروسکوپ وسپس کشت باکتری میباشد. رنگ آمیزی
علاوه بر افزایش کنتراست بین باکتری ومحیط ممکن است به افتراق وشناسایی باکتری کمک
نمایدوهمچنین برای مشاهده اجزای باکتری نیز از رنگ آمیزی استفاده می شود
تهیه گسترش
  
  
برای تهیه گسترش از ضایعات خشک
یا کلنی باکتریه در سطح محیط کشت جامد ابتدا باید سوسپانسیونی از باکتری تهیه گردد
.
بدین منظورابتدا توسط آنس استریل قسمتی ازترشحات ضایعه یا کلنی موجود درسطح محیط
کشت را برداشته ودرسرم فیزیولوزی ایزوتونیک موجود روی لام حل نمایید. در صورتی که
به خواهید از نمونه مایع یامحیط کشت مایع گسترش تهیه کنید توسط لوپ استریل یک قطره
از شیرابه میکروبی رابرروی لام قرارداده وآن رابر سطح لام پخش نمایید
بهتر است سوسپانسیون باکتری به
صورت ورقه نازک ویکنواخت روی لام پخش شود
جهت جلوگیری از شسته شدن باکتری
طی مراحل رنگ آمیزی بایستی باکتری تاحدودی به سطح لام بچسبد. این عمل که فیکس کردن
نامیده شده به روشهای متعددی انجام میشود. ازسادهترین روشها عبور دادن لام حاوی
گسترش برای چندین مرتبه ازروی چراغ است. لام باید در حدی گرم شودکه درصورت تماس
باپشت دست آن رانسوزاند
جداسازي مخلوط باكتريها :
Phenylethyl Alcohol Agar (PEA)
|
| Purpose This selective medium is used with mixed
bacterial cultures to isolate Gram positive bacteria from any Gram negative
organisms that may be present. |
| |
| Principle This agar contains Phenylethyl alcohol,
which either inhibits the growth of Gram negative organisms or reduces their
growth. This improves the ability to isolate Gram positive bacteria. The
medium also will prevent "swarming" (spreading over the entire surface of
plated medium) of the Gram negative Proteus species, which might
otherwise interfere with the isolation of Gram positive species. |
| Nutrient agar is a non-selective medium, therefore growth of
all organisms on the NA plate is good. |
 |
| Phenylethyl alcohol agar (PEA) is selective for G+ organisms, and
inhibits the growth of G- organisms.
When comparing growth on the PEA plate with that on the NA plate, it
can be seen than the G- organisms (Proteus vulgaris and
Escherichia coli did not grow as well on the PEA as they did
on the NA.
Growth of G+ organisms is unaffected. |
|
 |
تستهاي تخمير كربوهيدرات (فنل رد
برات)
محيطي
است كه شامل يكي از سه قند لاكتوز سوكروز يا كلوكوز است
هدف : اين تست استفاده
مي شود در مشخص كردن توانايي اركانيسم در تخمير كربوهيدراتهاي ساده مختلف (قند ها)
اصول : تخمير
يك بروسه متابوليكي است كه در بايان الكترون بذ يرنده مولكول ألي است
انديكاتور در ph
زير 6 زرد ودر phبالاتر از 7 صورتي-قرمز تيره است اكر
اركانيسم كربوهيدرات رامتابوليز كند كربوهيدرات اسيدي بعدي ممكن است
ph را در حد خنثي نكهدارد
خواندن تستها
|
اسيد :(زرد) تغيير رنك ازقرمز به زرد باكتري
قادر به تخمير قند است
اسيد وكاز : (رنك زرد بعلاوه حباب كاز)
تخميرقند بوسيله تغيير رنك به زرد مشخص مي شود كاز در لوله درهام تجمع مي
يابد وممكن است محيط به بالا رود
منفي :
بوسيله دوراه مشخص مي شود 1- بدون تغيير رنك كه يعني قند توسط باكتري مصرف
نشده 2- تغيير رنك به صورتي -قرمز تيره : اين تيركي رنك بخاطر
ألكالين يا توليد متابوليك بايه است كه ناشي ازاستفاده از ببتون است
|
|
| |
تخمير كلوكوز
|
تخمير كلوكوز
اركانيسم
|
نتيجه تست
|
|
1.كنترول |
منفي |
|
2. S. اوريوس |
اسيد |
|
3. P.
ولكاريس |
اسيد وكاز |
|
4. P.
ايروزينوزا |
منفي |
|
5. Eاشريشيا كولي |
اسيد وكاز |
|
|
تخمير لاكتوز
|
تخمير لاكتوز
اركانيسم
|
نتيجه تست
|
| 1.كنترل |
منفي |
| 2. S. اوريوس |
اسيد |
| 3. P. ولكاريس |
منفي |
| 4. P. ايروزينوزا |
منفي |
| 5. E. اشريشيا كولي |
اسيد وكاز |
|
|
تخمير سوكروز
|
تخمير سوكروز
اركانيسم
|
نتيجه تست
|
| 1. كنترل |
منفي |
| 2. S. اوريوس |
اسيد |
| 3. P. ولكاريس |
اسيد
وكاز |
| 4. P. ايروزينوزا |
منفي |
| 5. E. اشريشيا كولي |
منفي |
|
تست كازةين
هدف : شناسايي باكتري
هاي كه قادرند كاؤةين رابا استفاده أنزيم casease. هيدروليز
كنند
اصول : ميلك أكار داراي
داراي كازيين است كه باعث سفيدي شير مي شود بعضي از باكتري ها أنزيمcasease
ترشح ميكنند كه باعث شكستن مولكولهاي بزرك كازيين به بلي ببتيد هاي كوجكتر مي
شود واطراف كلني روشن تر مي شود
| |
| |
| 
. |
| 
bravenet.com
